Microscope Inversé pour l’imagerie de cellules vivantes en mode TIRF et super-résolution PALM-nSTORM
Notre microscope Nikon Ti-Eclipse est installé en espace confiné L3 pour l’imagerie de cellules vivantes infectées par microscopie de fluorescence à très haute résolution. Ce microscope est équipé d’un bras pour l’imagerie par réflexion totale interne (TIRF, total internal reflection fluorescence microscopy), ou onde évanescente, permettant d’étudier avec une très grande résolution la morphologie ou les évènements intervenant à la membrane plasmique de cellules vivantes.
Equipement :
Objectifs :
- Nikon Plan Achromat 20x / N.A. 0.4
- Nikon Plan Fluor 40x / N.A. 1.3 huile
- Nikon SR APO TIRF 100x /N.A. 1.49 huile
- Lasers
- 405 nm 100 mW
- 488 nm 200 mW
- 561 nm 500 mW
- 642 nm 1W
- Cubes fluo
- DAPI EX 377/50 DM 409 BA 447/60 (DAPI, HOECHST, AMCA, BFP, ALEXA FLUOR 350
- FITC EX 482/35 DM 506 BA 536/40 (FITC, rsGFP, BODIPY, 5-FAM, FLUO-4, ALEXA FLUOR 488)
- mCherry EX 562/40 DM 593 BA 640/75 (mCHERRY, mRFP)
- Cube tétrabande pour SR C-NSTORM QUAD 405/488/561/647
- Camera EMCCD Andor IXON ULTRA (512×512, pixel 16µm, readout 17 MHz, 16-bit single, EM amplifier)
- Source LED blanche et épifluorescence Intensilight 100w (Hg, pilotée par NIS)
- Bras TIRF Nikon
- Platine motorisée XYZ avec système Perfect-Focus PFS et platine nanodrive Z MCL
- Chambre et porte-échantillon thermostatés
- Lasers
Le microscope est installé dans une chambre d’incubation à 37°C pour maintenir la viabilité cellulaire.
Publications:
- Full assembly of HIV-1 particles requires assistance of the membrane curvature factor IRSp53
K. Inamdar et al., Elife Jun 11; 10:e67321 (2021) doi: 10.7554/eLife.67321.
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