Microscopie TIRF et Super-RĂ©solution L3

Microscope InversĂ© pour l’imagerie de cellules vivantes en mode TIRF et super-rĂ©solution PALM-nSTORM

Notre microscope Nikon Ti-Eclipse est installĂ© en espace confinĂ© L3 pour l’imagerie de cellules vivantes infectĂ©es par microscopie de fluorescence Ă  très haute rĂ©solution. Ce microscope est Ă©quipĂ© d’un bras pour l’imagerie par rĂ©flexion totale interne (TIRF, total internal reflection fluorescence microscopy), ou onde Ă©vanescente, permettant d’étudier avec une très grande rĂ©solution la morphologie ou les Ă©vènements intervenant Ă  la membrane plasmique de cellules vivantes.

Equipement : 

Objectifs :

  • Nikon Plan Achromat 20x / N.A. 0.4
  • Nikon Plan Fluor 40x / N.A. 1.3 huile
  • Nikon SR APO TIRF 100x /N.A. 1.49 huile
    • Lasers
      • 405 nm 100 mW
      • 488 nm 200 mW
      • 561 nm 500 mW
      • 642 nm 1W
    • Cubes fluo
      • DAPI EX 377/50 DM 409 BA 447/60 (DAPI, HOECHST, AMCA, BFP, ALEXA FLUOR 350
      • FITC EX 482/35 DM 506 BA 536/40 (FITC, rsGFP, BODIPY, 5-FAM, FLUO-4, ALEXA FLUOR 488)
      • mCherry EX 562/40 DM 593 BA 640/75 (mCHERRY, mRFP)
      • Cube tĂ©trabande pour SR C-NSTORM QUAD 405/488/561/647
    • Camera EMCCD Andor IXON ULTRA (512Ă—512, pixel 16µm, readout 17 MHz, 16-bit single, EM amplifier)
    • Source LED blanche et Ă©pifluorescence Intensilight 100w (Hg, pilotĂ©e par NIS)
    • Bras TIRF Nikon
    • Platine motorisĂ©e XYZ avec système Perfect-Focus PFS et platine nanodrive Z MCL
    • Chambre et porte-Ă©chantillon thermostatĂ©s
    Pilotage avec le logiciel NIS Elements NIKON

Le microscope est installé dans une chambre d’incubation à 37°C pour maintenir la viabilité cellulaire.